Когда план Дио по убийству Джорджа Джостара провалился, он попытался сперва отсрочить своё наказание, умоляя Джонатана дать ему больше времени. Но позже он бросился с ножом на ДжоДжо, которого своим телом защитил Джордж. Окропив кровью маску, Дио надел её на голову и стал вампиром. Он напал на собравшихся в поместье полицейских и убил их. В бой вступил Джонатан. В ходе потасовки начался пожар, Джонатан скинул Дио с высоты на копьё фамильной статуи Джостаров. Однако Дио выжил и позднее восстановил своё тело. Позже он создаёт себе вампиров-прислужников, которые атакуют Джонатана и его друзей. Позднее Джонатан всё-таки добирается до Дио, и завязывается бой. Джонатану удаётся поразить Дио Хамоном, и тот падает с крепостной стены. В полёте он отрывает себе голову, чтобы пламя Хамона не добралось до неё. Ван Чен тайком проносит голову Дио на корабль, где справляют медовый месяц Джонатан и Эрина. Дио пытается захватить тело ДжоДжо, чтобы сделать его своим. Джонатан, до того смертельно раненный, обхватывает голову Дио и исчезает с ним во взрыве. Остатки корабля идут ко дну.

100 лет спустя некие личности поднимают со дна Атлантического океана гроб, надеясь поживиться сокровищами. Однако внутри их ждал светловолосый вампир со швом на шее и родинкой в форме пятиконечной звезды. Дио всё-таки удалось осуществить задуманное — он захватил тело Джонатана, а кроме того пробудил один из самых сильных стендов — «The World». Стенды после стали пробуждаться у людей, не стала исключением и Холли Куджо — дочь Джозефа Джостара и мать Джотаро. Её стенд был паразитического типа, который высасывает жизнь из своего носителя. Чтобы остановить это, Джозефу, Джотаро и другим придётся убить Дио. Но Дио времени зря не терял — угрозами, обещаниями либо силой он заставлял носителей стендов прислуживать себе. Джотаро и компания пытались узнать секрет стенда Дио у побеждённых врагов, но они наотрез отказывались говорить, так как слишком боялись Дио. Способность «The World» была раскрыта, но ценой жизни друзей Джотаро. Битва с ним шла с переменным успехом, Джотаро даже удалось серьёзно ранить Дио, однако тот сделал финт ушами и выпил крови раненного Джозефа Джостара. От этого он восстановился, способность стенда усилилась, а Джотаро и вовсе пришёл в ярость. Джотаро остановил время с помощью «Star Platinum». Он нанёс Дио последний удар — и того разорвало на куски. Останки Дио сперва сохранили для передачи Фонду Спидвагона, но потом, после переливания крови Джозефу, их сожгли на солнечном свете и развеяли по ветру.

Становится известно, что возрождение Дио в «Рыцарях звёздной пыли» планировалось для создания совершенного мира, когда Луна достигла бы определённого угла в нужное время. Незадолго до событий «Рыцарей звёздной пыли» Дио наткнулся на Энрико Пуччи и вылечил ему больные ноги. Они провели очень много времени вместе, строя планы и интриги. Дио сомневался в преданности Пуччи, так как удивлялся, почему он до сих пор не использовал свой «Whitesnake», чтобы забрать себе «The World». Пуччи объяснял это тем, что его преданность и уважение к Дио безгранично, поэтому он не собирается предавать его. Дио оставил Пуччи одну из своих костей, чтобы не исчезнуть окончательно, когда он встретит свою смерть. Дио периодически появляется в воспоминаниях Пуччи на протяжении истории. Его кость играла важную роль в «Каменном океане».